Comment choisir un anticorps primaire?

IREC Bruxelles Woluwe

Les anticorps sont des outils largement utilisés dans diverses techniques de détection antigénique.

Pourtant, ils sont souvent mal choisis, mal utilisés et mal validés... 

Voici quelques informations et conseils pour vous guider dans le choix d'anticorps primaires.

 

1. Causes de non fiabilité des anticorps

Baker M. Reproducibility crisis: Blame it on the antibodies. Nature 2015 May 21;521(7552):274-6.

 

2. Comment choisir un anticorps primaire?

 

  • Choix de la technique de détection

Avant de choisir un anticorps primaire, il est important de définir la technologie la plus adaptée à la question scientifique posée.

Les techniques d' IHC, IHF, IC/IF (FCM) sont plus adaptées pour localiser une protéine

Les techniques de FCM, ELISA, WB sont plus indiquées pour mettre en évidence la présence ou l'abondance d'une protéine

La combinaison de plusieurs techniques est toujours conseillée.

Plus d'information dans la section conseils pour IHC-IHF-IC/IF

 

  • Ac monoclonal ou polyclonal?

Les deux ont des avantages et des inconvénients repris ci-dessous.

En IHC, les Ac monoclonaux sont souvent préférés.

 

 

  • Bases de données utiles

- antigènes humains

NordiQC (contrôle qualité d'immunohistochimies)

Human Protein Atlas (anticorps + profil d'expression protéique et ARN)

ImmunoHistoChemistry Frequently Asked Questions (librairie d'Ac utilisés en anapath)

- antigènes d'autres espèces

BenchSci

CiteAb

Antibodypedia

 

  • Conseils

Choisir un anticorps primaire doit faire l'objet d'une recherche méticuleuse. 

- Croisez les informations de plusieurs sources (littérature, bases de données, expertise de collègues,...)

- Sélectionnez la compagnie pour sa fiabilité et non pour le délai de livraison.

- Ne vous fiez pas aux étiquettes!!

 

  • La spin-off UCLouvain   est spécialisée dans la production de:

- isotypes contrôles
- anticorps secondaires monoclonaux: anti-Ig souris, rat, humain, porc, cheval, poulet
- Ig contrôles (ani-DNP,...)
- anticorps anti-cytokines